电子显微镜(SEM/TEM)的样品制备
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溅射镀膜机
电子显微镜对生物样本的分析可能会带来一些麻烦。由于大多数有机物由原子序数较低的元素组成,因此在未经处理的有机组织上进行扫描电子显微镜分析可能会导致信号低下,图像质量也较差。为了弥补这一缺陷,溅射镀膜机的设计会在样本柱顶部沉积一层细小的金颗粒薄膜。这层薄薄的金层(有时在高倍放大的扫描电镜中会使用铂金)有助于分散电子电荷,从而提高对比度,并增强二次电子的信号。
临界点干燥机
对于特别小的样品,薄薄的一层金不足以在扫描电子显微镜 (SEM) 上产生良好的图像。许多精细结构在空气中干燥时可能会发生翘曲,表面张力会导致组织以这种方式收缩。此外,未完全干燥的样品在暴露于电子束时可能会出现局部加热。根据样品的尺寸和干燥程度,由于电子束的强度,样品有时会发生剧烈翘曲,有时甚至会烧焦。
为此,临界点干燥器是一种完全手动的装置,利用二氧化碳的临界点将样品中的湿润中间流体交换为碳。这使得小样品能够完全干燥,并且在成像过程中不会因风干或高电子束强度而产生任何伪影。
Leica UC7 超薄切片机
薄切片对于透射电子显微镜和共聚焦显微镜技术都必不可少。超薄切片技术可以用玻璃刀缓慢刮下树脂块的碎片,从而获得薄至 50 纳米的切片。这些薄切片比大样本更容易处理,因为大样本可能太厚,无法在透射电子显微镜 (TEM) 下使用,因为电子束可能无法提供足够的对比度。扫描电子显微镜 (SEM) 和光学显微镜也能从切片中受益。在研究细胞内的特定组织甚至细胞器时,切取多个切片可能有助于确保获得最佳图像。

